تأثير بعض الحاميات مقارنة مع مستويات مختلفة من الجلسرول على حيوية الحيوان المنوي أثناء عملية تجميد ا

 Influence of some cryoprotectants in comparing with different glycerol levels on sperm viability during freezing process of goat semen

تأثير بعض الحاميات مقارنة مع مستويات مختلفة من الجلسرول على حيوية الحيوان المنوي أثناء عملية تجميد السائل المنوي في الماعز

سنة النشر: 2008

جهة النشر:
J. Agric. Sci. Mansoura Univ., 33 (7), July, 2008
مجلة العلوم الزراعية - جامعة المنصورة - مجلة 33 عدد 7 (يوليو) 2008.

القـائمون بالبحث:

1- أ.د/ عبد الخالق السيد عبد الخالق: قسم إنتاج الحيوان- كلية الزراعة- جامعة المنصورة
2- د/ مصطفى ماهر محمد المغازى: قسم الإنتاج الحيواني- كلية الزراعة - جامعة المنوفية
3- د/ شريف عبدالونيس جبر: قسم الإنتاج الحيواني - كلية الزراعة - جامعة طنطا

الهدف من البحث:
استخدم في هذه الدراسة 160 قذفه جيده جمعت من عشرة ظباء زاريبي بالغة متوسط وزنها 28.4±0.9 كيلوجرام وزن حي وعمر بين 25-35 شهر بمحطة البحوث بسخا خلال الفترة من يوليو إلى أغسطس كانت تجمع مرتين أسبوعيا لمدة 8 أسابيع. تم تصميم تجربتين الأولى كانت لتحديد انسب مستوى من الجلسرول (بمستويات من 1-7%). والثانية لمقارنة انسب مستوى من الجلسرول في التجربة الأولى مع مجموعتين من الـ Dimethyl sulfoxide "DMSO")) ومستويات مختلفــة (1 و3 و5 %) من إثيلينِ جليكول والإيثانول والميثانول في مخفف الـ Tris الأساسي ، ودراسة تأثير ذلك على النسبة المئوية لحيوية الحيوانات المنوية (SMP) ونسبة الاسترداد (%RR) أثناء مراحل عملية التجميد المختلفة (التخفيف والموازنة والذوبان).

وكانت أهم النتائج كما يلي:
أوضحت نتائج التجربة الأولى:
1- أن حيوية الحيوانات المنوية (SMP) في السائل المنوي بعد التخفيف وبعد الموازنة لم تتأثر معنوياً بمستوى الجلسرول حيث تراوح بين 79-81%. تراوحت نسبة الفقد في حيوية الحيوانات المنوية بين التخفيف والموازنة بين 1-3% في جميع مستويات الجلسرول ، وأن اقل نسبة فقد كانت عند مستوى 7% وأعلى نسبة كانت عند مستوى 5%. تراوح معدل الاسترداد (RR) بعد الموازنة بين 96.3 عند مستوى 5% إلى 98.8% عند مستويات 4 و7%.
2- كانت هناك زيادة تدريجية معنوية (P<0.05) في نسبة حيوية الحيوانات المنوية (SMP) من20 إلى 48% بزيادة مستوى الجلسرول من 1 إلى 6%. وأن زيادة مستوى الجلسرول إلى 7% أدى إلى خفض معدل الحركة للحيوانات المنوية قليلاً (46%).
3- كما أوضحت النتائج أن مستوى 6% جلسرول أعطى اقل نسبة فقد (30%) وأعلى نسبة استرداد (61.5%) في حيوية الحيوانات المنوية بعد الإسالة وكانت الفروق معنوية (P<0.05). وأن أعلى نسبة استرداد (72%) حدث بعد الإسالة بساعتين كانت عند مستوى 5% جلسرول ، لكن هذا لم يختلف معنوياً عن السائل المنوي المخفف بمستويات 6 و7% جلسرول. في حالة التركيز المنخفض من الجلسرول (1 و2%) كانت الحيوانات المنوية غير حيوية بعد ساعتين من الإسالة.

أظهرت نتائج التجربة الثانية:
4- أن السائل المنوي المخفف بـ 6% جلسرول أعطى أفضل النتائج من حيث حيوية الحيوانات المنوية ونسبة الاسترداد بعد التخفيف وبعد الموازنة بالمقارنة مع مستويات المخففات الأخرى. تشابه مستوى 3% من الإيثلين جليكول مع مستوى 6% جلسرول وأعطى نفس النتائج ، بينما كانت كل مستويات الميثانول اقل النتائج بالمقارنة مع المستويات الأخرى للحاميات.
5- كانت حيوية الحيوانات المنوية ونسبة الاسترداد في السائل المنوي بعد الإسالة أعلى معنوياً (P<0.05) وكانت نسبة الفقد اقل معنوياًَ (P<0.05) عند مستوى 6% جلسرول (47%) ، ثم عند مستوى 3% جلسرول + 3% DMSO وعند مستوى 6% DMS (39 و34% على التوالي).
6- كانت الحيوانات المنوية غير حيوية في السائل المنوي المخفف عند كل المستويات من الإيثانول أو الميثانول بعد ساعتين من الإسالة.
عموماً تأثرت حيوية الحيوانات المنوية (SMP) معنوياً (P<0.05) بعد الإسالة بساعتين في السائل المنوي المخفف بالجلسرول وDMSO أَو بإضافتهم معاً وكانت 33 و 16 و24% على التوالي. حدث نفس الشيء ، أيضاً بالنسبة لمعدل استرداد الحيوانات المنوية بعد ساعتين من الإسالة ، حيث كان70 و55.9 و61.5% على التوالي.

الخلاصــة:
يتضح من نتائج هذه الدراسة أن زيادة مستوى الجلسرول المضاف إلى مخفف الـ Tris حتى 6% لحماية السائل المنوي لتيوس الماعز الزاريبي أثناء عملية التجميد أدى إلى زيادة حيوية الحيوانات المنوية في السائل المنوي بعد الإسالة.

INFLUENCE OF SOME CRYOPROTECTANTS IN COMPARING WITH DIFFERENT GLYCEROL LEVELS ON SPERM VIABILITY DURING FREEZING PROCESS OF GOAT SEMEN
Abdel-Khalek, A.E.; M.M.El-Moghazy and Sh.A. Gabr
Department of Animal production, Faculty of agriculture, Mansoura, Minufiya and Tanta University.

ABSTRACT
Total of 160 good quality ejaculates were collected from 10 mature Zaraiby bucks (28.4±0.9 kg LBW and 25-35 mo old) during July-August period (twice/week for 8 wk) to determine the optimal level of, glycerol alone (1 to 7%, 1st experiment) and comparing the optimal level of glycerol with its combination with dimethyl sulfoxide (DMSO) and different levels (1, 3 and 5%) of ethylene glycol (EG), ethanol and methanol as cryoprotectants in Tris-based extender (2nd experiment), on sperm motility percentage (SMP) and recovery rate (RR%) at different freezing process stages (dilution, equilibrium and thawing). Results of the 1st experiment show that SMP in post-diluted and post-equilibrated semen was not affected significantly by glycerol (GL) level ranging between 79-81%. Loss in SMP between dilution and equilibrium ranged between 1-3% for all GL levels, being the lowest for 7% level and the highest for 5% level. Post-equilibrated RR of sperm motility ranged from 96.3 for 5% level to 98.8% for 4 and 7% levels. SMP showed gradual increase (P<0.05) from 20 to 48% by increasing GL level from 1 to 6%. Increasing GL level to 7% led to insignificant reduction in SMP (46%). Glycerol at 6% level showed the lowest (P<0.05) loss (30%) and highest RR (61.5%) of sperm motility in post-thawed semen. The highest RR (72%) was obtained in 2 h post-thawed semen with 5% GL level, but did not differ significantly from that diluted with 6 and 7% levels. No viable spermatozoa were found 2 h post-thawing in semen diluted with extenders containing low glycerol levels (1 and 2%). Results of the 2nd experiment show that semen diluted with 6% GL showed the best results based on SMP and RR in post-diluted and post-equilibrated semen as compared to the other cryoprotectant levels. Level of 3% EG level showed similar results to 6% GL level, while all methanol levels reflected the poorest results as compared to the other levels of cryoprotectants. In post-thawed semen, SMP and RR were the highest (P<0.05) and loss in SMP was the lowest (P<0.05) for 6% GL (47%), followed by 3% GL+3% DMSO and 6% DMS (39 and 34%, respectively). Non-viable spermatozoa were observed in 2 h post-thawed semen diluted with all levels of EG, ethanol or methanol. However, SMP in 2 h post-thawed semen was affected significantly (P<0.05) by diluents containing GL, DMSO or their combination, being 33, 16 and 24%, respectively. Similar trend was obtained for sperm recovery rate in 2 h post-thawed semen, being 70.0, 55.9 and 61.5%, respectively.
The current study indicated that adding glycerol to Tris-based extender at level of 6% for cryopreservation of Zaraiby goat semen frozen in pellets form yielded the highest sperm motility in post-thawed semen.
Keywords: Zaraiby goat, semen, freezing, sperm motility, cryoprotectants, glycerol.